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同一种细胞其筛选剂量和筛选时间也不一样。我自己认为,从理论上讲,如果稳定表达最好要一直筛选到细胞传代后。不知这种观点对不对。然而开始筛选的剂量、维持剂量以及筛选持续时间又该如何确定?维持剂量与开始筛选时的剂量是否有一定关系?[/b
2011年12月17日发布人:junjie05
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论道稳定株筛选,这个里面学问很大,不是一言两语能说的清楚的,我大概筛过几十种细胞的稳定株,算是有些小经验,有空我可以开个专题,和大家分享一下,如何用不同的载体去筛选稳定株,不同的细胞又要注意什么,现在又有什么新技术可以做稳定株筛选,使用
2012年03月15日发布人:hot_hot_hot
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我使用clontech 的smart试剂盒构建文库,预实验时在合成了ds cDNA后酶切过柱,电泳时什么也见不到,真是郁闷,试剂有限,尤其是柱子,一个试剂盒就5根,我试了两根,什么没做出来,我要用它建两个库。有没有大虾
2023年02月24日发布人:PCR
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),涂布,过夜培养,板上菌落数和菌落大小均正常。
一块板上挑了4个菌落克隆,用Kan抗性培养基试管培养过夜,用试剂盒提质粒,酶切发现没有目的片段。[/color][/size],[size=2][color=Black]
怀疑2种可能
2013年12月20日发布人:whitesheep
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:筛选基因和目的基因共表达的质粒
转染试剂:Lipofectamine2000
操作:转染→混合板培养及检测→单克隆培养及检测
转染:主要按照Lipofectamine2000说明书进行。见其Plasmid DNA
2012年05月10日发布人:fqswdzd
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各位师兄师姐好,我构建了真核表达载体用脂质体转染宫颈癌细胞后,是瞬时转染的,需要用G418筛选稳定细胞株,有了抗性克隆后如何让它大量扩增呢?我筛的细胞有了克隆后死活不长了真急死人了
2012年06月28日发布人:xingyi08
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各位细胞高手,新年好!
救救我吧:
我的细胞经转染后,G418筛选了12天,阴性对照组全部死亡,转染组出现了几个阳性克隆,再用G418维持筛选,至今已16天,现在每瓶
2012年08月11日发布人:guagua
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相关疾病:
感染
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时
2017年04月13日发布人:ffaa
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[size=14px][size=5][color=red]这是一个[url=http://www.antpedia.com/]仪器分析[/url]试题管理系统,[b]无需安装[/b]可以根据需要自动组成很多套试卷,并且带有答案和阅卷系统
2016年06月29日发布人:maicaixiaogu
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相关疾病:
结肠癌
各位老师
我现在用构建shRNA干扰载体,慢病毒包装,感染结肠癌细胞株,puromycin 筛选稳定感染的细胞(载体没GFP基因),想请问各位老师,感染后多长时间加药?你们筛选的浓度是多少
2015年10月20日发布人:sunbent